面對市面上紛繁的核酸染料,你知道哪款才適合自己的實(shí)驗(yàn)嗎?該如何選擇那?本文將百瑞極十余款核酸染料進(jìn)行分類整理,對每款核酸染料的功能及用途進(jìn)行概述, 希望對您的實(shí)驗(yàn)有幫助。
合集目錄
一、 電泳級核酸染料
二、qPCR 級核酸染料
三、細(xì)胞級核酸染料
一、電泳級核酸染料
Super GelGreen & Super GelRed
兩款都是高靈敏、無毒超安全和超穩(wěn)定的熒光核酸凝膠染色試劑(在工作濃度中)。它可替代溴化乙錠 (EtBr,EB)等不安全的核酸染料,且具有遠(yuǎn)高于EB 的靈敏度,同時(shí)不需要脫色。
兩款染料均適用于瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠,均具有高靈敏性,建議減少 DNA 的上樣量。推薦已知濃度樣品的上樣量為 50-200 ng/泳道(8泳道的小膠孔),對于未知濃度的樣品,嘗試上樣 2-3μL。
觀察方法:
Super GelGreen(藍(lán)光切膠儀)、Super GelRed ( 凝膠成像系統(tǒng) )
是一種靈敏、無致突變性超安全和超穩(wěn)定的熒光核酸凝膠染色試劑(在工作濃度中)。Super GelBlue 不僅可用于瓊脂糖凝膠電泳,也可用于丙烯酰胺凝膠核酸電泳。
SuperGelBlue 獨(dú)特的分子結(jié)構(gòu),在保證其高安全性和靈敏度的同時(shí),也不會(huì)影響 DNA 條帶的遷移。即使 DNA 上樣量很高,也可以獲得很好的條帶分離效果。
Super GelBlue 適用于藍(lán)光切膠儀進(jìn)行觀察。
Super PAGE GelRedTM
一種專門染色聚丙烯酰胺凝膠 DNA 的,無毒、無誘變性的紅色核酸染料??梢允褂门渲昧?EB 濾光器的 254 nm 紫外透射儀呈像(凝膠成像)。
二、qPCR 級核酸染料
SYBR Green I
SYBR Green I 是一種結(jié)合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的、具有綠色激發(fā)波長的染料。
EvaGreen?
EvaGreen?是一種新型的專門為qPCR和高分辨率溶解曲線分析設(shè)計(jì)的DNA結(jié)合染料。具有以下特點(diǎn)
1. 按需求釋放
極大地降低了對PCR擴(kuò)增的抑制性。可使用高濃度染料,獲得高亮信號。
2. 安全性高
常規(guī)的DNA結(jié)合染料存在潛在的致突變性。Super EvaGreen?染料<SYBR Green I
3. 穩(wěn)定性極強(qiáng)。
在緩沖溶液中的染料可以安全的儲(chǔ)存在室溫或冰箱里,也可以反復(fù)凍融。與之相反,SYBR Green I 不穩(wěn)定而且降解后對 PCR 抑制性更強(qiáng)。
4. 簡單方便。
它的PCR產(chǎn)物可以直接用于凝膠電泳檢測,不需要額外添加任何核酸染料。可以作為DNA預(yù)染的核酸染料,電泳后可以直接用于觀察DNA條帶。
三、細(xì)胞染料級核酸染料
請查看往期文章: 常見細(xì)胞器染色(3)--細(xì)胞核
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